پیمان نوروزی، دگوان کای، محمد علی ملبوبی، بهمن یزدی صمدی،
دوره ۷، شماره ۳ - ( ۷-۱۳۸۲ )
چکیده
ژن‌های OF۲ ( نوعی اکسالات اکسیداز) و VAP که در مسیر پیام رسانی مقاومت به نماتد سیستی در چغندرقند هستند، قبلاً به ترتیب به کمک نشانگر مولکولی AFLP و سیستم دو هیبریدی در ناقل باکتریایی همسانه شده‌اند. برای آزمون قابلیت این ژن‌ها در ایجاد مقاومت در چغندرقند، ژن‌ها به ناقلین گیاهی قابل بیان منتقل گردیدند. برای این منظور، ژن OF۲ پس از جدا سازی، درون T-DNA ناقل دوگانه pAM۱۹۴ در پایین‌دست پروموتر ذاتی CaMV۳۵S و نیز درون T-DNA ناقل دوگانه pBin۱۲۱ تغییر یافته در پایین‌دست پروموتر القایی ژن Hs۱pro-۱ (ژن مسؤل ایجاد مقاومت به نماتد سیستی) قرار گرفت. ژن VAP نیز پس از جدا سازی از همسانه اولیه، در T-DNA پلاسمید pAM۱۹۴ در پایین‌دست پروموتر ذاتی CaMV۳۵S قرار گرفت. بدین ترتیب، سه سازه جدید که بیان کننده ژن‌هایی از مسیر پیام رسانی مقاومت به نماتد چغندرقند بودند ساخته شد. سپس این سه پلاسمید به آگروباکتریوم ریزوژنز سویه AR۱۵۸۳۴ جداگانه منتقل شدند و پس از آن، جداکشت دم‌برگ گیاه چغندرقند با آگروباکتری تلقیح شد. ریشه‌های مویین حاصل از تراریختی، پس از تأیید اولیه با روش رنگ‌آمیزی GUS و یا PCR، به منظور بررسی مقاومت با لارو نماتد تلقیح شدند. نتایج اولیه وجود مقاومت نسبی در برابر لارو نماتد را در شماری از ریشه‌های مویین نشان داد. این مقاومت را می‌توان به اثر ژن‌هایOF۲ و VAP نسبت داد.
